LncRNA芯片定制檢測服務(wù)
實驗技術(shù)簡介:長鏈非編碼RNA (long non-coding RNA, IncRNA) 是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt、 不編碼蛋白的RNA。IncRNA起初被認(rèn)為是基因組轉(zhuǎn)錄的“噪音”，不具有生物學(xué)功能。然而，近年來的研究表明IncRNA能在表觀遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因表達(dá)，參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄干擾、核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程，與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。
雖然越來越多的IncRNA被發(fā)現(xiàn)，但是人們現(xiàn)在了解到的IncRNA只是冰山一角，絕大部分的IncRNA的功能仍然是不清楚的。目前主要通過IncRNA芯片或新-代測序等方法對IncRNA進行功能研究。 現(xiàn)階段，基因芯片技術(shù)發(fā)展趨于成熟穩(wěn)定，在此平臺上，通過設(shè)計不同的IncRNA探針，可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學(xué)過程中差異表達(dá)的IncRNA和mRNA信息，終找到IncRNA的靶基因 位點深入分析調(diào)控機制。
實驗操作流程:
1、樣品RNA抽屜、質(zhì)檢
2、cDNA/aRNA樣品合成和標(biāo)記
3、芯片雜交
4、洗滌、染色、掃描
5、圖像采集和數(shù)據(jù)分析
IncRNA芯片數(shù)據(jù)- -IncRNA差異 表達(dá)基因的篩選一對IncRNA重新注釋mRNA差異表達(dá)基因的篩選-→G0分析，pathway分析IncRNA與mRNA共表達(dá)分析
客戶提供:
1、實驗對象為組織樣品，取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，使用
BioPulverizerTM冰凍粉碎組織，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen)，使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。
2、實驗對象為細(xì)胞樣品，每份樣品取1x106 ~ 1x107細(xì)胞，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細(xì)胞，每10cm2培養(yǎng)皿TRIzo使用量為1m)，裂解后抽提RNA。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、芯片檢測數(shù)據(jù)
2、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告 (含軟件分析結(jié)果)以及實驗材料
實驗代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測 | 細(xì)胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細(xì)胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
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免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量（Label-free）實驗 |
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