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　　美國(guó)程序降溫盒這個(gè)梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率，由于美國(guó)程序降溫盒內(nèi)存在100%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯，因此美國(guó)程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇。

　　美國(guó)程序降溫盒的使用經(jīng)驗(yàn)：雖然梯度降溫的起始點(diǎn)是室溫20°左右，但是凍存液里面的DMSO對(duì)細(xì)胞有毒性，尤其是室溫的時(shí)候，所以凍存盒和凍存液先預(yù)放至4°，等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放入凍存盒后，立刻轉(zhuǎn)移到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮。凍存盒中的異丙醇應(yīng)使用5~7此后更換一次，而且保證液體量不低于250ml刻度線，否則降溫效果會(huì)受到影響。異丙醇：無(wú)色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹浴⒂卸疽后w，熔點(diǎn)是-87.9度。請(qǐng)注意其可燃性。

　　美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于zui底線。

　　美國(guó)程序降溫盒肯定是先放在室溫，然后放進(jìn)去細(xì)胞，置于-80，利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫啊。

　　美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)2：實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度，需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來(lái)用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?，F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的，很方便，效果也不錯(cuò)的。

　　美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮，效果很不錯(cuò)。